Инфекции кровотока у ВИЧ-инфицированных пациентов
Аминева Полина Геннадьевна
Заведующая лабораторией
Несмотря на резкое снижение смертности от СПИДа и оппортунистических инфекций после внедрения комбинированной антиретровирусной терапии (кАРВТ), инфицирование вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) остается причиной повышенного риска инфекций кровотока (ИК).
ВИЧ-инфицированные пациенты остаются «хрупкой» популяцией даже после достижения приемлемого иммунологического статуса, смертность таких пациентов снижается до уровней, сравнимых с общей популяцией, только после 6-10 лет восстановления иммунной системы и подавления РНК ВИЧ.
Особенности иммунологического статуса как фактор риска развития ИК
Многие факторы предрасполагают ВИЧ-инфицированных пациентов к инвазивным бактериальным и грибковым инфекциям; в частности, измененный клеточный иммунитет, дисфункция В-клеток с последующим отсутствием сывороточных опсонинов, а также качественный и количественный дефицит нейтрофилов.
ВИЧ-инфицированные пациенты не обладают полным иммунитетом до тех пор, пока количество клеток CD4+T (CD4) не увеличится до >750 клеток/мкл.
У ВИЧ-инфицированных пациентов с количеством клеток CD4 >500 клеток/мкл риск инфекционных заболеваний и даже СПИД-индикаторных инфекций (например, рецидивирующей пневмонии и внелегочного туберкулеза) выше по сравнению с общей популяцией.
Исследование START-INSIGHT в 2015 году показало значительные преимущества от немедленного начала антиретровирусной терапии у пациентов с ВИЧ-инфекцией независимо от числа CD4+. Задержка в получении АРВТ является доказанным фактором риска в развитии ИК у ВИЧ-инфицированных пациентов.
Основные возбудители инфекций кровотока у ВИЧ-инфицированных:
- Типичные возбудители ИК: S. pneumoniae, S. aureus (в т.ч. MRSA), коагулазоотрицательные стафилококки, E. coli и P. aeruginosa, Salmonella spp.
- Микроскопические грибы (Cryptococcus spp., Candida spp., Penicillium marneffei и Histoplasma capsulatum).
- ВАЖНО: среди патогенов, ответственных за инфекции кровотока у ВИЧ-инфицированных, Mycobacteria spp., Cryptococcus neoformans и небрюшнотифозные сальмонеллы (NTS) представляют собой СПИД-индикаторные состояния.
Микробиологическое (культуральное) исследование крови на стерильность с определением чувствительности к антибактериальным и антимикотическим препаратам
подготовка к исследованию | взятие биоматериала
Исследование гемокультур является "золотым" стандартом для выявления в кровотоке бактерий (бактериемии) или микроскопических грибов (дрожжеподобных, мицелиальных). Гемокультивирование проводят с целью:
- верификации инфекционной этиологии состояния;
- идентификации возбудителя;
- уточнения источника бактериемии;
- назначения этиотропной или коррекции эмпирической антибиотикотерапии.
Венозную кровь забирают для исследования сразу во флакон с питательной средой, содержащей все необходимые питательные компоненты для роста микроорганизмов. Во флаконе также создана специальная газовая атмосфера (для культивирования аэробных - содержится кислород, для облигатных анаэробов - кислород отсутствует, тогда как факультативно-анаэробные бактерии культивируются и в аэробных, и в анаэробных флаконах). Во флакон добавлены гранулы полисорбата, чтобы нейтрализовать действие на бактерии остаточного количества антибиотиков в крови пациента. Флаконы с кровью инкубируются в автоматическом анализаторе гемокультур. На дне флакона расположен датчик, который реагирует изменением цвета на повышение углекислого газа, который выделяется при росте бактерий. Геманализатор фиксирует показания датчика и в режиме реального времени сигнализирует при проросте флакона. После положительного сигнала врач-микробиолог идентифицирует возбудителя либо напрямую из флакона, либо при помощи субкультивирования крови на плотной питательной среде.
Для идентификации до рода и вида микроорганизма используется метод прямого белкового профилирования (MALDI-TOF масс-спектрометрия), при необходимости используются другие методы идентификации (серотипирование, ПЦР, секвенирование). Для определения чувствительности микроорганизма к антибактериальным препаратам используется диско-диффузионный метод или автоматизированная система, для определения чувствительности к антимикотикам используется тест-система c панелью антимикотических препаратов или автоматизированная система. В подавляющем большинстве случаев длительность исследования для положительных гемокультур составляет - 2-3 суток, отрицательный результат выдается при отсутствии роста во флаконе в течение 5 суток, при необходимости индивидуально срок инкубации может быть продлен.
При интерпретации результата исследования учитывается:
- вид микроорганизма (следующие микроорганизмы чаще всего являются контаминантами (этиологически не значимыми): Streptococcus viridans group, кроме случаев эндокардита; CNS – при наличии других признаков контаминации; Bacillus spp., кроме Bacillus cereus, Bacillus anthracis, Bacillus subtilis; Corynebacterium spp., кроме C. jeikium);
- рост перечисленных микроорганизма (см.выше) в одном флаконе из 2-х скорее всего, это тоже свидетельствует о контаминации;
- замедленная скорость роста (кроме истинно медленно растущих микроорганизмов, например, Candida), например, 48 часов для коагулазо-негативных стафилококков - скорее всего свидетельствет о контаминации;
- наличие бактериемии при отсутствие других критериев сепсиса (шкала SOFA, qSOFA) или в остуствии клинических проявлений тяжелой инфекции.
Показания к проведению исследования: сепсис, септический шок, инфекция кровотока, связанная с катетером (КАИК), эндокардит; длительная лихорадка неясного генеза; тяжелые инфекции (например, брюшной тиф и бруцеллез), тяжелые инфекции, протекающие с вторичной бактериемией (уросепсис, пневмония, хирургические инфекции: остемиелит, пиогенный артрит и др.)
Код услуги: М10.19.2
Срок выполнения: 5 суток (До отрицательного результата. При необходимости возможно продление инкубации на более длительный срок)
Микробиологическое (культуральное) исследование крови на Neisseria meningitidis без определения чувствительности к антимикробным препаратам
подготовка к исследованию | взятие биоматериала
Код услуги: М18.19.1
Срок выполнения: 3 суток
Определение ДНК условно-патогенных бактерий, вызывающих нозокомиальные и внебольничные инфекции методом амплификации НК с флуоресцентной детекцией в режиме "реального времени"
Вид биоматериала:
| Цельная кровь | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Моча | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Мокрота | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Кал | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Аспираты/экссудаты | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Соскобы эпителия с дыхательных путей (зев/нос) | Зев подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Нос подготовка к исследованию | взятие биоматериала | |
| Соскобы эпителия с ЖКТ и УГТ | Соскоб эпителия прямой кишки подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Соскоб цервикального канала | |
| Соскоб влагалища | |
| Соскоб уретры | |
| Бактериальные культуры |
Код услуги: М23.40.6.2
Срок выполнения: 1 сутки
Определение генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам методом амплификации НК с флуоресцентной детекцией в режиме "реального времени"
Вид биоматериала:
| Цельная кровь | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Моча | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Мокрота | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Кал | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Аспираты/экссудаты | подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Соскобы эпителия с дыхательных путей (зев/нос) | Зев подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Нос подготовка к исследованию | взятие биоматериала | |
| Соскобы эпителия с ЖКТ и УГТ | Соскоб эпителия прямой кишки подготовка к исследованию | взятие биоматериала |
| Соскоб цервикального канала | |
| Соскоб влагалища | |
| Соскоб уретры | |
| Бактериальные культуры |
Код услуги: П9.1
Срок выполнения: 1 сутки
Определение поверхностного антигена (HBsAg) вируса гепатита B (Hepatitis B virus) методом иммуноферментного анализа
подготовка к исследованию | взятие биоматериала
Вид биоматериала:
- Сыворотка крови
Код услуги: И3.41.1
Срок выполнения: 3 суток
Определение суммарных антител классов M и G (anti-HCV IgG и anti-HCV IgM) к вирусу гепатита C (Hepatitis C virus) методом иммуноферментного анализа
подготовка к исследованию | взятие биоматериала
Вид биоматериала:
- Сыворотка крови
Код услуги: И3.42.1
Срок выполнения: 3 суток